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PCR常用荧光染料的化学结构介绍
发布时间: 2017-05-27    被读次数: 728
    PCR常用荧光染料的化学结构:
    荧光染料溴化乙锭,EtBr分子结构最常用、最便宜的DNA/RNA染色剂(结构如上图)。在琼脂糖胶里,EtBr的灵敏度是检测到至少1 ng 的DNA。染色过程可以是通过制作含有EtBr的琼脂糖胶,或者是在跑完胶后对整个胶体用EtBr稀释液染色。EtBr在紫外光照射下散发出橘黄色的光,当EtBr与DNA结合后,发光量大大增强。这就是为什么一整块经过EtBr处理的琼脂糖胶,在紫外光下,只有DNA所在的地方会发出强光,而不是整块胶都强光闪闪。EtBr即给DNA染了色,也标记了DNA,让我们了解到目标DNA的长短。唯一的不好就是,EtBr是潜在的可致癌诱变剂,所以在使用的时候一定要避免直接接触,使用有效防护,注意安全。
    荧光染料SYBR系列Thermo Fisher 出产的SYBR系列主要有三种:SYBR-Green,SYBR-Gold和SYBR-safe。SYBR-Gold有超高灵敏度(最低检测25 pg DNA),而SYBR-Green灵敏度稍低一些(大概在最低 60 pg DNA),SYBR-safe和EtBr灵敏度相似。不同于EtBr,SYBR系列染料不仅可以被紫外光激发,还可以被蓝光激发,因此避免了紫外光可能对DNA样本造成的破坏或突变。根据名字,我们也可以知道SYBR-safe是安全的、无害的,但另外两种却是潜在致癌物,使用时要小心。
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